Новая разработка компании БИАНАЛИТИКА
Измерение хемилюминесценции крови
обусловленной процессами перекисного окисления липидов (ПОЛ)
на анализаторе ФЛЮОРАТ-02-АБЛФ-Т
В настоящее время нарастает интерес к измерению хемилюминесценции сыворотки (плазмы) крови, не только среди медицинских научно-исследовательских организаций, но и среди лечебно-профилактических учреждений. В первую очередь такой интерес обусловлен возможностью получения информации о процессах перекисного окисления липидов в организме пациентов по измерению хемилюминесценции сыворотки(плазмы) крови.
Изучение подобных реакций методом хемилюминесценции до последнего времени сдерживалось отсутствием доступных аппаратных средств (хемилюминометров) и отработанных методик измерения хемилюминесценции крови с высоким квантовым выходом. Каждая лаборатория, работающая с данными реакциями, для повышения квантового выхода хемилюминесценции пыталась самостоятельно подобрать условия протекания реакции, в попытке использовать для измерения хемилюминесценции, имеющиеся в их распоряжении аппаратные средства.
Компанией "БИАНАЛИТИКА" (группа компаний «ЛЮМЭКС», г.Санкт-Петербург), совместно с Научно-исследовательским институтом детских инфекций Росздрава, проведен цикл работ по измерению хемилюминесценции сыворотки крови на универсальном анализаторе для биохимического анализа «Флюорат-02-АБЛФ-Т» производства группы компаний Люмэкс, г.Санкт-Петербург. Полуавтоматический анализатор имеет три режима измерения - фотометрический, флуоресцентный и хемилюминесцентный. Хемилюминесценция сыворотки крови измерялась в режиме хемилюминометра, с использованием специальной хеми-вставки, входящей в комплект поставки прибора, а результаты измерения обрабатывались с помощью встроенной в анализатор программы для кинетических измерений хемилюминесценции. В качестве измеряемого параметра была выбрана «Светосумма» хемилюминесценции за время 60 секунд. Инициирующий хемилюминесценцию рабочий раствор люминола и перекиси водорода, вводился в реакционную кювету шприцом через небольшое отверстие в крышке прибора.
Измерение хемилюминесценции проб сыворотки (плазмы) проводилось в присутствие химического активатора (люминола – 3-аминофталевого гидразида) и перекиси водорода. Под действием свободных радикалов пробы происходит образование радикала люминола, который вступает в реакцию с супероксидным радикалом, образуя внутреннюю перекись (диоксид). Ее разложение приводит образованию возбужденной молекулы 3-аминофталата. Переход этой молекулы в основное состояние сопровождается испускание кванта света. Было показано, что отношение сигнал/шум хемилюминесцентного сигнала люминол-зависимой хемилюминесценции сыворотки крови в присутствии перекиси водорода при регистрации на анализаторе может достигать значений 20 и более. Такие большие сигналы хемилюминесценции позволяют проводить широкий круг прикладных исследований с использованием измерений хемилюминесценции, и не только в образцах сыворотки крови, но также и в суспензиях клеток крови (лейкоцитов и эритроцитов).
Изучение подобных реакций методом хемилюминесценции до последнего времени сдерживалось отсутствием доступных аппаратных средств (хемилюминометров) и отработанных методик измерения хемилюминесценции крови с высоким квантовым выходом. Каждая лаборатория, работающая с данными реакциями, для повышения квантового выхода хемилюминесценции пыталась самостоятельно подобрать условия протекания реакции, в попытке использовать для измерения хемилюминесценции, имеющиеся в их распоряжении аппаратные средства.
Компанией "БИАНАЛИТИКА" (группа компаний «ЛЮМЭКС», г.Санкт-Петербург), совместно с Научно-исследовательским институтом детских инфекций Росздрава, проведен цикл работ по измерению хемилюминесценции сыворотки крови на универсальном анализаторе для биохимического анализа «Флюорат-02-АБЛФ-Т» производства группы компаний Люмэкс, г.Санкт-Петербург. Полуавтоматический анализатор имеет три режима измерения - фотометрический, флуоресцентный и хемилюминесцентный. Хемилюминесценция сыворотки крови измерялась в режиме хемилюминометра, с использованием специальной хеми-вставки, входящей в комплект поставки прибора, а результаты измерения обрабатывались с помощью встроенной в анализатор программы для кинетических измерений хемилюминесценции. В качестве измеряемого параметра была выбрана «Светосумма» хемилюминесценции за время 60 секунд. Инициирующий хемилюминесценцию рабочий раствор люминола и перекиси водорода, вводился в реакционную кювету шприцом через небольшое отверстие в крышке прибора.
Измерение хемилюминесценции проб сыворотки (плазмы) проводилось в присутствие химического активатора (люминола – 3-аминофталевого гидразида) и перекиси водорода. Под действием свободных радикалов пробы происходит образование радикала люминола, который вступает в реакцию с супероксидным радикалом, образуя внутреннюю перекись (диоксид). Ее разложение приводит образованию возбужденной молекулы 3-аминофталата. Переход этой молекулы в основное состояние сопровождается испускание кванта света. Было показано, что отношение сигнал/шум хемилюминесцентного сигнала люминол-зависимой хемилюминесценции сыворотки крови в присутствии перекиси водорода при регистрации на анализаторе может достигать значений 20 и более. Такие большие сигналы хемилюминесценции позволяют проводить широкий круг прикладных исследований с использованием измерений хемилюминесценции, и не только в образцах сыворотки крови, но также и в суспензиях клеток крови (лейкоцитов и эритроцитов).
